Le dosage hormonal est une étape cruciale en biochimie clinique pour évaluer l’état endocrinien d’un patient, diagnostiquer des pathologies, ou suivre une thérapie hormonale. Les hormones, présentes à de très faibles concentrations dans le sang ou d’autres fluides biologiques, nécessitent des techniques sensibles, spécifiques et fiables. Cet article présente les principales méthodes utilisées pour doser les hormones, leurs principes, avantages et limites.
1. Dosage immunologique (Immunoessais)
Principe général
Les dosages hormonaux utilisent majoritairement des techniques basées sur la reconnaissance spécifique anticorps-antigène. Un anticorps dirigé contre l’hormone cible permet de quantifier sa concentration dans un échantillon.
Types d’immunodosages
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Radio-immunoessai (RIA)
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Méthode historique utilisant des anticorps et des hormones marquées par des isotopes radioactifs (I-125).
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Très sensible et spécifique, mais nécessite un matériel spécifique et une gestion des déchets radioactifs.
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Immunoessai enzymatique (ELISA)
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Hormone détectée par un anticorps marqué à une enzyme (ex : peroxydase, phosphatase).
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Réaction enzymatique produit un signal colorimétrique mesuré par spectrophotométrie.
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Méthode très répandue, sans danger, avec une bonne sensibilité.
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Immunofluorescence
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Utilise des anticorps marqués avec des fluorochromes.
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Lecture par cytométrie ou fluorimétrie.
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Permet la détection qualitative ou quantitative.
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Chimiluminescence (CLIA)
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Marqueur chimiluminescent produit un signal lumineux lors de la liaison hormone-anticorps.
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Très sensible, rapide et automatisable.
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2. Techniques chromatographiques
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Chromatographie en phase liquide (HPLC) ou gaz (GC) couplée à la spectrométrie de masse (MS)
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Permet la séparation et identification précise des hormones, notamment stéroïdes ou peptides.
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Utilisée surtout en recherche ou pour des dosages très spécifiques.
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3. Dosage biochimique direct
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Certaines hormones peuvent être dosées par des méthodes enzymatiques ou biochimiques directes (ex : glucose pour l’insuline indirectement, ou dosage des hormones thyroïdiennes par réactions chimiques).
4. Dosage par électrophorèse
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Rarement utilisé pour les hormones, mais peut séparer des protéines plasmatiques spécifiques associées aux hormones.
5. Techniques émergentes
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Biocapteurs et nanotechnologies : développement de capteurs biosensibles permettant un dosage rapide, miniaturisé et à faible coût.
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Dosages multiplexés : quantification simultanée de plusieurs hormones dans un même échantillon (ex : panels hormonaux).
Paramètres influençant les dosages hormonaux
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Prélèvement sanguin : moment (diurne, post-prandial), type de tube, conditions de conservation.
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Variations physiologiques : âge, sexe, cycle menstruel, grossesse.
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Effets médicamenteux pouvant interférer avec les résultats.
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Sensibilité et spécificité des anticorps utilisés.
Applications cliniques
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Diagnostic des pathologies endocriniennes : hypothyroïdie, hyperthyroïdie, syndrome de Cushing, diabète, hypogonadisme, etc.
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Surveillance des traitements hormonaux (ex : substituts thyroïdiens, corticostéroïdes).
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Suivi de la croissance, de la fertilité et des cycles menstruels.
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Dépistage néonatal et évaluation de la fonction surrénalienne.
Avantages et limites des techniques
| Technique | Avantages | Limites |
|---|---|---|
| RIA | Très sensible et spécifique | Manipulation substances radioactives |
| ELISA | Sécurité, automatisation possible | Parfois moins sensible que RIA |
| Chimiluminescence | Grande sensibilité, rapidité | Coût des réactifs |
| HPLC-MS | Très spécifique, quantification précise | Coût élevé, technique complexe |
Les techniques de dosage hormonal en biochimie sont variées et en constante évolution. Le choix de la méthode dépend de l’hormone ciblée, du contexte clinique, de la sensibilité requise et des moyens disponibles. L’interprétation des résultats doit toujours prendre en compte les conditions biologiques et pré-analytiques. Ces dosages sont essentiels pour le diagnostic, la prise en charge et le suivi des désordres endocriniens.